導語：

接種看似簡單，實則是發(fā)酵成敗的第一道生死線。尤其在工業(yè)發(fā)酵領(lǐng)域，每一次染菌事故都可能意味著數(shù)百萬的損失，而每一次菌種活力的衰退都可能讓生產(chǎn)效率大打折扣。

傳統(tǒng)接種的痛點：

1. 接種量難控制：接種量過小導致代謝延滯，菌種易提前老化，雜菌比生長速率擴大，增加污染的風險。接種量過大會過早引起溶氧不? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?足、營養(yǎng)物質(zhì)消耗過快，導致發(fā)酵失控。

2. 菌種活力衰退：手工接種操作難以捕捉最佳接種窗口期。

3. 隱性污染風險：開放式操作讓每批次都面臨微生物"偷渡"的威脅。

隨著自動化技術(shù)的發(fā)展，同時保證精準控制接種量、菌種質(zhì)量與無菌操作已不再是難題。

本期應用分享

自動化接種：Tmax Bio-M(1L)極簡型發(fā)酵罐 與 Tmax Bio-5L 發(fā)酵罐聯(lián)用，建立“小罐種子液→自動化接種→大罐發(fā)酵”體系，旨在解決人工接種痛點，提升發(fā)酵效率。

一、種子液培養(yǎng)

本次種子液采用Tmax Bio-1L極簡型發(fā)酵罐培養(yǎng)，并與搖瓶同步進行比對。將大腸桿菌分別接種 到Tmax Bio-1L極簡型發(fā)酵罐和搖瓶后，通過定時取樣，在BODS(生物培養(yǎng)過程在線檢測儀)上同時檢測OD 600值，繪制生長曲線圖。

1、種子液接種

2、繪制生長曲線

3、結(jié)果

針對工業(yè)常用菌株大腸桿菌，Tmax Bio-1L極簡型發(fā)酵罐獲得比搖瓶更好的培養(yǎng)結(jié)果，Tmax Bio-1L極簡型發(fā)酵罐通過強化傳質(zhì)（溶氧、混合）、環(huán)境精準控制（通氣、溫度）等多維度協(xié)同作用，使大腸桿菌迅速跨越延遲期，更快進入對數(shù)生長期且同時期OD值高于搖瓶。最終確定大腸桿菌接種時間為第5h。

二、自動化接種

1、設(shè)置Tmax Bio-5L 發(fā)酵罐順控模式

發(fā)酵罐滅菌并連接好后，設(shè)置順控參數(shù)，具體參數(shù)如下圖所示，在開始發(fā)酵后，開啟順控模式。

2、自動接種參數(shù)設(shè)置

3、結(jié)果

隨著順控模式的進行，補料泵等可以正常運行，一級種子液接種至Tmax Bio-1L極簡型發(fā)酵罐后，二級種子液開始培養(yǎng)；第5h，Tmax Bio-5L 發(fā)酵罐補料泵運行，自動化接種開始，設(shè)定時間結(jié)束后補料泵關(guān)閉，停止接種。大罐接種成功并開始發(fā)酵。

圖3-大腸桿菌發(fā)酵數(shù)據(jù)圖

綠色線-溶氧值曲線；藍色線-溫度值曲線；紅色線-攪拌值曲線；褐色線-補料速度曲線

? ? ??Tmax Bio-1L極簡型發(fā)酵罐具備接近大型發(fā)酵條件的簡易裝置，較于搖瓶可以實現(xiàn)更佳的種子液培養(yǎng)。?

? ? ? Tmax Bio系列發(fā)酵罐搭配智能順控模塊，既能實現(xiàn)發(fā)酵過程的培養(yǎng)、監(jiān)測與調(diào)控，同時可實現(xiàn)自動化接種，從源頭優(yōu)化發(fā)酵過程。

? ? ? ?“小罐種子液→自動化接種→大罐發(fā)酵”的自動化接種，相對于傳統(tǒng)搖瓶手動接種方式，提供了更加便捷、更符合生物發(fā)酵放大培養(yǎng)理念的自動化系統(tǒng)。期待其更廣泛的應用提升生物發(fā)酵的效率與質(zhì)量。

關(guān)于Tmax Bio系列發(fā)酵罐

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