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應(yīng)用案例
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ARTP誘變結(jié)合碘乙酸和脫氫表雄酮篩選實(shí)現(xiàn)高DHA含量裂殖壺菌突變體的代謝分析

來(lái)源:   作者: 發(fā)布日期:2022-02-21 訪問(wèn)量:3223

本期為您推薦天津大學(xué)張衛(wèi)文教授研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表在知名期刊《Frontiers in Bioengineering and Biotechnology 》上的一篇文章,文章原名:Metabolic Analysis of Schizochytrium Mutants With High DHA Content Achieved With ARTP Mutagenesis Combined With Iodoacetic Acid and Dehydroepiandrosterone Screening。

文章摘要內(nèi)容如下:

DHA是人類(lèi)大腦皮層和視網(wǎng)膜的重要組成部分,并在嬰兒和兒童的神經(jīng)發(fā)育中發(fā)揮作用。它在預(yù)防心血管疾病和抗炎、抗腫瘤方面也有積極的作用。海洋魚(yú)類(lèi)是DHA的傳統(tǒng)來(lái)源,然而,由于海洋魚(yú)類(lèi)數(shù)量的減少以及積累的重金屬和有機(jī)污染物,人們開(kāi)始尋找可持續(xù)和高質(zhì)量的DHA來(lái)源的替代方法。近年來(lái),采用菌株改良、發(fā)酵過(guò)程優(yōu)化和基因工程等方法可以提高裂殖酵母的DHA效度和產(chǎn)量。與其他育種方法相比,基于大氣壓射頻輝光放電的常壓室溫等離子體技術(shù)具有正效率高、表突變體多等諸多優(yōu)點(diǎn),近年來(lái)廣泛應(yīng)用于裂殖菌等海洋微生物育種。

本研究采用ARTP誘變結(jié)合脫氫表雄酮和碘乙酸篩選方法,對(duì)裂殖酵母ATCC 20888進(jìn)行篩選,得到3個(gè)突變體:6-8、6-16和6-23,均有生長(zhǎng)和DHA積累的增加。LC/MS代謝組學(xué)分析顯示,PPP和EMP的代謝增加以及TCA循環(huán)的減少可能與突變體的生長(zhǎng)和DHA生物合成的增加有關(guān)。最后,在5L發(fā)酵罐中評(píng)價(jià)了生長(zhǎng)和積累量最高的突變體6-23。結(jié)果表明,突變體6-23發(fā)酵96h的DHA濃度和產(chǎn)率分別為41.4g/L和430.7mg/L/h。本研究為產(chǎn)DHA的裂殖體提供了一種新的菌株改進(jìn)策略。


文章精彩內(nèi)容如下:

01
1 裂殖菌ATCC20888對(duì)選定藥物的篩選及敏感性
02
2 搖瓶培養(yǎng)物中生物量積累、總脂肪酸和DHA濃度的比較
03
圖5 5L發(fā)酵罐中生物量積累、葡萄糖濃度、總脂肪酸和DHA含量的比較


本期為您推薦天津大學(xué)張衛(wèi)文教授研究團(tuán)隊(duì)發(fā)表在知名期刊《Frontiers in Bioengineering and Biotechnology 》上的一篇文章,文章原名:Metabolic Analysis of Schizochytrium Mutants With High DHA Content Achieved With ARTP Mutagenesis Combined With Iodoacetic Acid and Dehydroepiandrosterone Screening。

文章摘要內(nèi)容如下:

DHA是人類(lèi)大腦皮層和視網(wǎng)膜的重要組成部分,并在嬰兒和兒童的神經(jīng)發(fā)育中發(fā)揮作用。它在預(yù)防心血管疾病和抗炎、抗腫瘤方面也有積極的作用。海洋魚(yú)類(lèi)是DHA的傳統(tǒng)來(lái)源,然而,由于海洋魚(yú)類(lèi)數(shù)量的減少以及積累的重金屬和有機(jī)污染物,人們開(kāi)始尋找可持續(xù)和高質(zhì)量的DHA來(lái)源的替代方法。近年來(lái),采用菌株改良、發(fā)酵過(guò)程優(yōu)化和基因工程等方法可以提高裂殖酵母的DHA效度和產(chǎn)量。與其他育種方法相比,基于大氣壓射頻輝光放電的常壓室溫等離子體技術(shù)具有正效率高、表突變體多等諸多優(yōu)點(diǎn),近年來(lái)廣泛應(yīng)用于裂殖菌等海洋微生物育種。

本研究采用ARTP誘變結(jié)合脫氫表雄酮和碘乙酸篩選方法,對(duì)裂殖酵母ATCC 20888進(jìn)行篩選,得到3個(gè)突變體:6-8、6-16和6-23,均有生長(zhǎng)和DHA積累的增加。LC/MS代謝組學(xué)分析顯示,PPP和EMP的代謝增加以及TCA循環(huán)的減少可能與突變體的生長(zhǎng)和DHA生物合成的增加有關(guān)。最后,在5L發(fā)酵罐中評(píng)價(jià)了生長(zhǎng)和積累量最高的突變體6-23。結(jié)果表明,突變體6-23發(fā)酵96h的DHA濃度和產(chǎn)率分別為41.4g/L和430.7mg/L/h。本研究為產(chǎn)DHA的裂殖體提供了一種新的菌株改進(jìn)策略。


文章精彩內(nèi)容如下:

01
1 裂殖菌ATCC20888對(duì)選定藥物的篩選及敏感性
02
2 搖瓶培養(yǎng)物中生物量積累、總脂肪酸和DHA濃度的比較
03
圖5 5L發(fā)酵罐中生物量積累、葡萄糖濃度、總脂肪酸和DHA含量的比較


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