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常壓室溫等離子誘變選育L?色氨酸高產菌株

來源:   作者: 發(fā)布日期:2022-03-01 訪問量:3452

本期為您推薦江蘇澳創(chuàng)生物科技有限公司王健教授研究團隊發(fā)表在知名期刊《食品與發(fā)酵工業(yè)》上的一篇文章:常壓室溫等離子誘變選育L?色氨酸高產菌株。

文章摘要內容如下:

?色氨酸是人和動物體內的一種必需氨基酸,是構成蛋白的重要組成部分,但人和動物自身不能合成L?色氨酸,必須從外界攝取。目前L-色氨酸的生產方法以微生物發(fā)酵法為主,相比傳統(tǒng)的化學合成法和蛋白質水解法,微生物發(fā)酵法具有更低的生產成本、更加綠色環(huán)保、更易于大規(guī)模生產等顯著的優(yōu)越性。微生物發(fā)酵法生產L-色氨酸的過程中,微生物菌種的優(yōu)劣決定著發(fā)酵生產過程中的生產工藝、生產成本甚至產品質量,因此,選育高產色氨酸優(yōu)良菌株具有重要意義。常壓室溫等離子體(atmospheric and room temperature plas-ma,ARTP)誘變技術最近幾年在科研及工業(yè)領域逐步得到應用,尤其在微生物突變育種中取得了良好的效果。與其他誘變育種技術相比,ARTP 誘變育種技術能夠更有效造成 DNA 的突變,并且設備操作簡單快捷,對環(huán)境條件要求較低,操作過程中安全性較高,在高效進化育種領域具有較大的應用潛力。

本研究中,為了提升發(fā)酵法產L-色氨酸的生產效率,使用常壓室溫等離子誘變育種技術,并結合結構類似物抗性定向篩選的方法,選育高產色氨酸菌株。將出發(fā)菌 Escherichia coli AC-1042 經過ARTP誘變處理后,在抗性培養(yǎng)基平板上篩選具有5-甲基色氨酸、對氟苯丙氨酸抗性的突變菌株,選取產酸高、遺傳穩(wěn)定的菌株重復進行ARTP誘變處理和抗性篩選,不斷提高菌株對結構類似物的抗性水平。經過多次ARTP誘變處理和抗性篩選,獲得1株色氨酸高產菌株ACTRP104,經過30L發(fā)酵罐培養(yǎng)44h后L-色氨酸質量濃度可以達到61.65g/L,葡萄糖轉化率達到20.64%,比出發(fā)菌分別提高了20.69%和17.81%。結果表明,ARTP誘變和結構類似物抗性篩選相結合,可以有效地獲得色氨酸高產突變菌株,大大提高色氨酸的發(fā)酵生產技術水平,獲得的色氨酸高產菌株ACTRP104具有較好的工業(yè)化應用前景。

文章精彩內容如下:

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文章摘要內容如下:

?色氨酸是人和動物體內的一種必需氨基酸,是構成蛋白的重要組成部分,但人和動物自身不能合成L?色氨酸,必須從外界攝取。目前L-色氨酸的生產方法以微生物發(fā)酵法為主,相比傳統(tǒng)的化學合成法和蛋白質水解法,微生物發(fā)酵法具有更低的生產成本、更加綠色環(huán)保、更易于大規(guī)模生產等顯著的優(yōu)越性。微生物發(fā)酵法生產L-色氨酸的過程中,微生物菌種的優(yōu)劣決定著發(fā)酵生產過程中的生產工藝、生產成本甚至產品質量,因此,選育高產色氨酸優(yōu)良菌株具有重要意義。常壓室溫等離子體(atmospheric and room temperature plas-ma,ARTP)誘變技術最近幾年在科研及工業(yè)領域逐步得到應用,尤其在微生物突變育種中取得了良好的效果。與其他誘變育種技術相比,ARTP 誘變育種技術能夠更有效造成 DNA 的突變,并且設備操作簡單快捷,對環(huán)境條件要求較低,操作過程中安全性較高,在高效進化育種領域具有較大的應用潛力。

本研究中,為了提升發(fā)酵法產L-色氨酸的生產效率,使用常壓室溫等離子誘變育種技術,并結合結構類似物抗性定向篩選的方法,選育高產色氨酸菌株。將出發(fā)菌 Escherichia coli AC-1042 經過ARTP誘變處理后,在抗性培養(yǎng)基平板上篩選具有5-甲基色氨酸、對氟苯丙氨酸抗性的突變菌株,選取產酸高、遺傳穩(wěn)定的菌株重復進行ARTP誘變處理和抗性篩選,不斷提高菌株對結構類似物的抗性水平。經過多次ARTP誘變處理和抗性篩選,獲得1株色氨酸高產菌株ACTRP104,經過30L發(fā)酵罐培養(yǎng)44h后L-色氨酸質量濃度可以達到61.65g/L,葡萄糖轉化率達到20.64%,比出發(fā)菌分別提高了20.69%和17.81%。結果表明,ARTP誘變和結構類似物抗性篩選相結合,可以有效地獲得色氨酸高產突變菌株,大大提高色氨酸的發(fā)酵生產技術水平,獲得的色氨酸高產菌株ACTRP104具有較好的工業(yè)化應用前景。

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